Size-Exclusion Chromatography: Tudo o que Você Precisa Saber

A size-exclusion chromatography (SEC), também conhecida como gel permeation chromatography (GPC), é uma técnica cromatográfica usada para separar moléculas com base no tamanho. É amplamente utilizada em bioquímica e biotecnologia para a purificação de proteínas, ácidos nucleicos e outras biomoléculas.

Como Funciona a Size-Exclusion Chromatography?

A SEC separa as moléculas com base em seu tamanho molecular, permitindo que apenas moléculas de um tamanho específico passem através de uma matriz porosa. As moléculas menores tendem a penetrar mais profundamente na matriz, resultando em um tempo de eluição maior. Já as moléculas maiores não conseguem entrar nos poros e, portanto, são eluídas primeiro.

Aplicações da Size-Exclusion Chromatography

A SEC tem diversas aplicações em diferentes campos científicos:

1. Purificação de Proteínas: Utilizada para remover impurezas e concentrar proteínas de interesse.
2. Determinação de Massa Molecular: Pode ser usada para estimar o tamanho de macromoléculas.
3. Análise de Polímeros: A SEC é aplicada para analisar a distribuição de peso molecular em polímeros.

Vantagens da Size-Exclusion Chromatography

• Não destrutiva: Não requer reagentes que alterem a estrutura ou função das biomoléculas.
• Rápida e Eficiente: Permite a separação rápida de grandes quantidades de amostras.
• Amigável ao Analito: Ideal para moléculas sensíveis que podem ser degradadas por outras técnicas de separação.

Considerações Importantes

Ao utilizar a SEC, é crucial escolher a coluna adequada e otimizar as condições de eluição para obter os melhores resultados.

A size-exclusion chromatography é uma ferramenta poderosa e essencial no arsenal de qualquer laboratório que trabalhe com biomoléculas.